پلی‏اتیلن گلیکول ۲۰۰؛ روشی سریع و ارزان برای استخراج dna از باکتری‏های گرم مثبت و گرم منفی

اهداف: به طور کلی استخراج dna از باکتری‏های گرم مثبت بسیار مشکل و پرهزینه است. هدف از این مطالعه استفاده از پلی‏اتیلن گلیکول 200 به منظور استخراج dna از باکتری گرم مثبت لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس و باکتری گرم منفی سودوموناس آئروژینوزا و انجام pcr روی آنها به منظور جست وجو به ترتیب برای ژن‏های lacto و exoa بود. مواد و روش‏ها: در این مطالعه سویه‏ استاندارد باکتری گرم مثبت لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس و باکتری گرم منفی سودوموناس آئروژینوزا به ترتیب بر روی محیط کشت mrs آگار و مولرهینتون آگار کشت داده شدند. سپس کلونی باکتری در بافر te حل شد و با استفاده از peg 200 استخراج dna انجام شد. واکنش pcr بر روی ژن‏های lacto (اختصاصی لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس) و exoa (سودوموناس آئروژینوزا) اختصاصی هر ارگانیسم انجام شد. یافته‏ها: pcr روی ژن‏های انتخاب شده برای هر اُرگانیسم انجام و وجود ژن‏های lacto با اندازه 231bp برای سویه استاندارد لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس و سویه لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس جداشده از لبنیات و exoa با اندازه 396bp برای سویه استاندارد سودوموناس آئروژینوزا و سویه‏های بالینی سودوموناس آئروژینوزا روی ژل آگارز مشاهده شد. نتیجه‏گیری: از آنجایی که استخراج dna از باکتری‏های گرم مثبت به دلیل داشتن دیواره بسیار محکم مشکل است، استفاده از peg 200 می‏تواند روش بسیار مناسب، مقرون به صرفه و بسیار سریع و در دسترس برای استخراج dna از باکتری‏های گرم مثبت باشد. علاوه بر این، با استفاده از این روش می‏توان به آسانی dna باکتری‏های گرم منفی و قارچ‏ها را نیز استخراج نمود.